液相色谱仪安装条件注意事项
安装液相色谱仪的实验台应水平、稳固、并具有足够的放置空间。避免在具有腐蚀性气体、大量灰尘或能产生强磁场的地方安装本仪器,否则将会影响仪器的正常运转及缩短仪器的使用寿命。
应安装四个以上三芯电源插座(220V,5~10A),**具有专门的接地线(注意,绝不能将电源线的中线作为接地线),并确保输出电源的电压稳定,否则会导致仪器的不正常运作。
如果实验室无专用的接地线,一般可用Φ15~20mm的铜棒打入地下1~1.5米,用Φ1.2mm左右的塑胶单股导线连接到电源插座的接地端。
如果实验室电压不稳定,应使用稳压器等必要设备,使电源电压稳定。
实验室的室温应控制在15℃-30℃范围内,并且波动要小;湿度在45~85%范围内。
由空调或其他设备产生的气流不要直吹仪器,避免光线直射及振动。
液相色谱仪的启动顺序:先开高压恒流泵和紫外检测器,待紫外检测器自检完毕,回到默认波长254nm后,再开计算机及打开工作站软件。
液相色谱仪关闭顺序:先按泵停止,关闭氘灯,退出工作站软件,然后再关仪器。
液相色谱仪应由专人负责,如果使用人员不固定,请准备《仪器使用登记本》,以明确使用情况,及时处理和保养。
流动相使用的注意事项
液相色谱仪**使用HPLC级或相当于该级别的流动相,并要先经0.45μm薄膜过滤。
过滤后的流动相**经过充分脱气,以除去其中溶解的气体(如O2),如不脱气易产生气泡,增加基线噪声,造成灵敏度下降,甚至无法分析。
几中脱气方法比较:
1. 氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高。
2. 加热回流法:效果较好,但操作复杂,且有毒性挥发污染。
3. 抽真空脱气法:易抽走有机相
4. 超声脱气法:一种较为常见的脱气法。流动相放在超声波容器中,用超声波震荡10~15分钟,此法效果并不是太好,但操作简单。
如果管路中使用peek树脂部件,请不要使用下列流动相:
浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜
特别注意
含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法:
1. 先用10︰90的甲醇/水冲洗,以洗去缓冲盐,清洗时间至少为一小时。
2. 再用70︰30的甲醇/水冲洗系统,清洗时间至少为40分钟。
3.将系统保存在纯甲醇中。
流动相的更换
在分析过程中,有时需要更换流动相进行分析。一定要注意前一种使用的流动相和所更换的流动相是不是能够相溶。如果前一种使用的流动相和所更换的流动相不能够相溶,那您就要特别注意了。要采用一种与这二种需更换的流动相都能够相溶的流动相进行过渡、清洗。较为常用的过渡流动相为异丙醇,但实际操作中要看具体情况而定,原则就是采用与这二种需更换的流动相都能够相溶的流动相。一般清洗的时间为30~40分钟,直至系统完全稳定。
如不进行以上“特别注意”上述步骤的操作,将会导致系统管路堵塞。严重时将引起流通池污染堵塞,不得不更换流通池。用户就要承担不必要的损失了。
储液器的注意事项
保持流动相储液器的清洁是保证液相色谱仪正常使用的关键。要使用HPLC级的溶剂,对试剂含有缓冲盐及非HPLC级的流动相一定要用0.45μm过滤器除去其中的微粒物质。