FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与高效液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。
快速蛋白液相色谱(FPLC)简介
FPLC为专门用来进行蛋白质、多肽及多核苷酸分离的系统,FPLC为近年来的一项重要革新,其除了对HPLC的快速、高分辨率等特性加以保持,并且其还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性。所以近年来,其广泛应用于分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面。伴随着HPLC的发展,有薄壳型填料和双扩散灌流型填料两种新型填料出现了,对于分离大分子物质,它们的优越性独特,从而大大拓展了FPLC的应用领域。其能够进行蛋白的含量的测定以及蛋白的分子量的确定,能够分离纯化蛋白、有机化合物,所以其在生物学领域和化学领域的研究可以得到使用。
近些年以来,在HPLC基础上发展出了新型色谱技术,包括低压液相色谱(LPLC)、中压液相色谱(MPLC)以及快速蛋白液相色谱(FPLC),在这些新型色谱技术当中,快速蛋白液相色谱(FPLC)可以非常迅速地分离复杂混合物,能够在短时间内对大量样品加以纯化。其特性表现为较大的容量、较高的回收效率以及不易失活的生物大分子等。能够越来越广泛地使用于生命科学研究及药物生产上。
FPLC、HPLC应用范围:
FPLC专门用于分离纯化蛋白质、多肽及多核苷酸。
HPLC能够对低沸点低相对分子质量分子、高沸点中分子、高分子有机化合物(包括极性、非极性)、离子型无机化合物、热不稳定生物分子加以分析。